饲料中蛋白氮和非蛋白氮的测定有什么快速法吗?拜托了各位 谢谢就是想找一个测定的快速方法

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就是想找一个测定的快速方法

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一、硫酸铜沉淀法 根据非蛋白氮的化学性质来看,大部分溶于水,一部分在常温下不溶水,但在沸水中溶解.根据此种性质,可以先将样品煮沸,用硫酸铜将样品中的蛋白质沉淀下来,由于非蛋白氮已经溶于水,故可用过滤方法将其与样品中的蛋白质分离.在过滤时,水的温度一定不能太低,否则象双缩脲一类的物质会因为不溶于常温水而不能被过滤掉.用此种方法测定出的蛋白质含量称为样品的真蛋白质.但实际上,此种方法有很大的局限性.如果非蛋白氮不溶于沸水,或者将一般的非蛋白氮微囊化,此种方法测出的结果会与样品中的实际真蛋白有很大的差异. 二、氨基酸测定法 为了真正能够判定样品中是否掺有非蛋白氮,需测定样品中的氨基酸含量.无论采用经典的氨基酸自动分析仪分析（柱后衍生）,还是采用比较快捷的HPLC分析（往前衍生）,将所测定的氨基酸总量相加得到一个总氨基酸数值,然后将此数值乘以6.25为M,和用凯氏定氮法测定的粗蛋白质N相比较,M至少为N的85％（M可能略大于N）.如果低于此数值,则可以判定该样品中掺有非蛋白氮. 三、水解蒸馏法 1、 原理：非蛋白氮主要包括五类：尿素及其衍生物类、氨态氮类、铵类、肽类及其衍生物、动物粪便及其它废弃物类.如果在原料中掺有氨态氮类、铵类和粪便比较容易判断（可采用硫酸铜沉淀法加镜检）,一般很少将肽类及其衍生物掺入其中,剩下比较难鉴别的就是尿素及其衍生物.尿素和尿素衍生物经过强酸或强碱水解为氨盐或氨和其它的物质,在强碱的条件下可以蒸馏出氨气,原料中的蛋白质经过水解成氨基酸盐,氨基酸盐在强碱条件下稳定,从而可将非蛋白氮和真蛋白氮进行分离. 2、仪器和设备：酒精喷灯,试管和其它常用的仪器. 3、试剂与溶液：6mol/l的盐酸溶液和其它常用的试剂. 4、测定方法：本文只列出用酸水解的方法.采集有代表性样品约100g,混匀后用四分法缩分出209左右,将其粉碎,使其全部通过60目样品筛.精确称取0.3000g的样品,置于容积为60ml的试管底部（注意样品勿沾在管壁上）,加入30ml 6mol/l的盐酸溶液,将试管在距试管口1～2cm处用喷灯加热并封口.将封好的试管置于干燥箱内,于110℃下水解24h.冷却后打开试管,将水解液过滤至100ml容量瓶中,用蒸馏水反复多次冲洗试管和滤纸,然后定容至刻度.用10ml移液管移取10ml样液移入半微量式定氮仪的反应室中,加入20ml 1∶1的氢氧化钠溶液蒸馏10 min,余下的步骤按照测定粗蛋白的方法进行操作,得出样品所消耗的盐酸的体积为V1（ml）.同时作空白滴定可得消耗的盐酸的体积为V0,设所称样品的质量为M（g）. 5、非蛋白氮的粗蛋白质计算公式 CP(%)＝（V1-V0）×C×O.14×6.25/M 蛋白就用 凯氏定氮法 1、 样品处理：精密称取0.2-2.0g固体样品或2-5g半固体样品或吸取10-20ml液体样品（约相当氮30-40mg）,移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中,加入0.2g硫酸铜,3g硫酸钾及20毫升硫酸,稍摇匀后于瓶口放一小漏斗,将瓶以45度角斜支于有小孔的石棉网上,小火加热,待内容物全部炭化,泡沫完全停止后,加强火力,并保持瓶内液体微沸,至液体呈蓝绿色澄清透明后,再继续加热0.5小时.取下放冷,小心加20ml水,放冷后,移入100ml容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混匀备用.取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸铵同一方法做试剂空白试验. 2、 按图装好定氮装置,于水蒸气发生器内装水约2/3处加甲基红指示剂数滴及数毫升硫酸,以保持水呈酸性,加入数粒玻璃珠以防暴沸,用调压器控制,加热煮沸水蒸气发生瓶内的水. 3、 想接收瓶内加入10ml 2%硼酸溶液及混合指示剂1滴,并使冷凝管的下端插入液面下,吸取10.0ml样品消化液由小玻璃杯流入反应室,并以10ml水洗涤小烧杯使流入反应室内,塞紧小玻璃杯的棒状玻璃塞.将10ml 40%氢氧化钠溶液倒入小玻璃杯,提起玻璃塞使其缓慢流入反应室,立即将玻璃盖塞紧,并加水于小玻璃杯以防漏气.夹紧螺旋夹,开始蒸馏,蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内,蒸馏5min.移动接收瓶,使冷凝管下端离开液皿,再蒸馏1min,然后用少量水冲洗冷凝管下端外部.取下接收瓶,以0.01N硫酸或0.01N盐酸标准溶液定至灰色或蓝紫色为终点. 同时吸取10.0ml试剂空白消化液按3操作. 计算： X =(（V1-V2）*N*0.014)/( m*（10/100）) +F*100 X：样品中蛋白质的含量,g； V1：样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积,ml； V2：试剂空白消耗硫酸或盐酸标准溶液的体积,ml； N：硫酸或盐酸标准溶液的当量浓度； 0.014：1N硫酸或盐酸标准溶液1ml相当于氮克数； m：样品的质量（体积）,g（ml）； F：氮换算为蛋白质的系数 . 蛋白质中的氮含量一般为15～17.6%,按16%计算乘以6.25即为蛋白质,乳制品为6.38,面粉为5.70,玉米、高粱为6.24,花生为5.46,米为5.95,大豆及其制品为5.71,肉与肉制品为6.25,大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83,芝麻、向日葵为 5.30.