为什么PCR所用退火温度要比引物实际Tm低那么几度?请从原理角度分析.

为什么PCR所用退火温度要比引物实际Tm低那么几度?请从原理角度分析. 为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度? 关于退火温度与引物Tm~我用PP5做的引物发现引物Tm值比退火温度低 这很奇怪啊,做PCR是不是退火温度一定要比Tm高呢? 退火温度与引物的TM值有什么联系?为什么退火温度要比TM低5度左右最合适? 请教如何计算出兼并引物的退火温度我是一个新手,如何根据公司送来的兼并引物的单子上的Tm值推出实际PCR时的退火温度呢?引物单子上有两个Tm值,分别是1M 钠离子,50mM钠离子条件下的Tm值.实 用primer 5.0 设计引物的时候,哪个才是真正的PCR产物退火温度Tm,看哪个? RT-PCR,自己前后引物Tm差7度,前引物63度,后引物58度,退火温度如何设置? 请问PCR反应最初的退火温度应该怎样设定?是应该比引物设计公司的提供的tm高呢,还是低呢,应该相差多少呢? pcr退火温度太高有什么缺点pcr的引物如果很长,导致tm值很高,这样扩增的退火温度就会很高,如达到65-70℃,会不会导致模板正反链的复性,从而导致扩增效率降低? 退火温度低会对PCR产生什么影响?我做菌落PCR,使用一个特异性上游引物和一个T7下游通用引物,退火温度用的是较低的48度,但引物的Tm分别为57,71,阳性对照都没有出结果,请问是怎么回事呢?退火 为什么生物公司合成的引物退火温度比设计的温度要低10度,我用哪个! pcr引物退火温度55度时不行,58度可以,为什么在做PCR时,引物用55度的退火温度扩不出来,而用58度却扩出来了,为什么 为什么PCR时会有杂带?引物没有污染,退火温度改了好多次,是特异性不好吗? 做RT-PCR时,上下引物退火温度一定要一样吗?内参条带很亮,为什么没有目的基因? 求助巢式PCR退火温度的设定我最近准备做巢式PCR,下游引物用oligo dT,上游用两个基因特异性引物,但上游的两个引物和下游的oligo dT相比,Tm值差了将近10度,这样退火温度怎么设定呢? 我设计了引物,结果生物公司合成的引物退火温度比我设计的低10度,为什么,我用哪个退火温度 询问PCR退火温度设计引物单上数据如下上游TTACAAGATGGAGCCTCACC（GC含量50%）Tm（1M Na+）：68.2Tm（50mM Na+）：46.6下游CAAAGAATAACCCAGGACGA（GC含量45%）Tm（1M Na+）：66.2Tm（50mM Na+）：44.6顺便问下大家,Tm（1 ISSR-PCR引物的退火温度问题我做ISSR-PCR引物的退火温度能不能直接使用primer5.0这个软件计算得出的退火温度.理论上来说这是最佳的退火温度吗?