作业帮pcr,cDNA引物的问题用真核细胞mRNA反转录出来的cDNA来做引物进行pcr扩增,模板DNA是什么呢?如果是真核细胞中提取的DNA,那不也是有内含子的么?那我怎么来得到目的基因呢?第一个的意思是，在做m
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/11 05:48:06
pcr,cDNA引物的问题用真核细胞mRNA反转录出来的cDNA来做引物进行pcr扩增,模板DNA是什么呢?如果是真核细胞中提取的DNA,那不也是有内含子的么?那我怎么来得到目的基因呢?第一个的意思是，在做m
pcr,cDNA引物的问题
用真核细胞mRNA反转录出来的cDNA来做引物进行pcr扩增,模板DNA是什么呢?
如果是真核细胞中提取的DNA,那不也是有内含子的么?那我怎么来得到目的基因呢?
第一个的意思是，在做mRNA反转录的时候，不是通常会有片段丢失，所以得到的不是完整cDNA，所以做PCR，用反转录得到的cDNA做引物，那模板呢？
pcr,cDNA引物的问题用真核细胞mRNA反转录出来的cDNA来做引物进行pcr扩增,模板DNA是什么呢?如果是真核细胞中提取的DNA,那不也是有内含子的么?那我怎么来得到目的基因呢?第一个的意思是，在做m
同学,从你问问题的情况我猜想你可能有些基本问题很含糊.
我试着分析一下.
1.首先PCR是体外大量扩增目的DNA的技术.
你问模板DNA是什么,这是不需要问的,你想扩增的目的基因是什么什么就是模板.你用cDNA来做PCR模板当然是cDNA双链了.（一定是双链）
cDNA做模板,引物当然不是cDNA了,而是可以与cDNA单链互补配对的一段寡核苷酸.（引物是设计的）
总结一下
mRNA是已经去除了内含子的→反转录出cDNA单链→合成双链cDNA→pcr,得到的大量cDNA产物,相当于对真核生物DNA的有用信息（我们想研究的信息---外显子）做了扩增.
2 mRNA反转录不会丢失片段.真核DNA转录初级产物是带内含子的,切除内含子后连接外显子就得到了mRNA.
3 直接提取的真核DNA做PCR,得到的是完整的DNA产物.至于你问怎么得到目的基因,我不太能理解.首先你要知道你的目的基因是什么,你的目的基因是真核生物的完整DNA,就用DNA做PCR；目的基因是cDNA就用cDNA做PCR.
弄清PCR过程,原理,和一些名词,再看你的问题,你会发现根本不是问题.
没懂发站内信交流.
第一问回答，模板当然是cDNA啦，既然你的都是逆转录产物，做PCR扩增肯定是cDNA。
第二问，如果用直核细胞的DNA做PCR，想要得到目的基因，是有内含子序列的。
真核提取的DNA你转录为RNA时内含子就排除了，再反转录得到DNA就可以了吧。
"所以做PCR，用反转录得到的cDNA做引物"你这个理解是不对的，cDNA就是是作PCR模板用的；
mRNA反转录的时候，是会有片段断裂或者不完整，但是，mRNA的拷贝数有几十万甚至几千万个，不会每个mRNA拷贝在你扩增的目的基因处都断裂或者降解掉的。
另外，提取RMA的时候，一般情况不会有DNA污染的，就算有，我们也可以通过引物的设计来避免扩增出基因组DNA。设计引物的时候，使其...
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"所以做PCR，用反转录得到的cDNA做引物"你这个理解是不对的，cDNA就是是作PCR模板用的；
mRNA反转录的时候，是会有片段断裂或者不完整，但是，mRNA的拷贝数有几十万甚至几千万个，不会每个mRNA拷贝在你扩增的目的基因处都断裂或者降解掉的。
另外，提取RMA的时候，一般情况不会有DNA污染的，就算有，我们也可以通过引物的设计来避免扩增出基因组DNA。设计引物的时候，使其在两个外显子的连接处，这样就可以避免扩增出基因组DNA了
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