急……提取RNA的动物组织怎么采集?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/28 12:26:19
急……提取RNA的动物组织怎么采集?

急……提取RNA的动物组织怎么采集?
急……提取RNA的动物组织怎么采集?

急……提取RNA的动物组织怎么采集?
Trizol法
1、将组织在液氮中磨成粉末后,再以50-100mg组织加入1ml的Trizol液研磨;每2E6个细胞加入1mLTrizol.注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%.
2、研磨液室温放置5min,然后以每1ml Trizol液加入0.2ml的比例加入氯仿,盖紧离心管,用手剧烈摇荡离心管15秒,静置5min,12,000rpm离心5min.
3、取上层水相于一新的离心管,按每1ml Trizol液加0.5ml异丙醇的比例加入异丙醇,剧烈振摇使混匀,4℃,12,000rpm离心10min.
4、弃去上清液,按每1ml Trizol液加入至少1ml的比例加入70%乙醇,涡旋混匀 ,4℃×7,500rpm×5min.
5、重复以上步骤.
6、小心弃去上清液,然后室温或真空干燥5-10min,加入30μL RNase Free的水中.
7、电泳检测.

不会吧 mRNA,tRNA,和rRNA 检验的话用荧光定位PCR就行了 蛋白质或者DNA,跑块琼脂糖胶看看,胶孔里有东西的话就可能是蛋白质或者DNA. 发现美

新鲜组织切下来后直接扔液氮里速冻,保存在-80,运输用干冰。这样采集的动物组织中RNA质量最好。
如条件不允许,还有生物公司出的RNA保存试剂,按照试剂的说明书操作即可操作。具体的您可以去网上搜索RNA 保存 试剂 即可。
长时间保存,且对RNA完整性无要求的,可以用石蜡包埋法长期保存,但对RNA质量有较大影响。...

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新鲜组织切下来后直接扔液氮里速冻,保存在-80,运输用干冰。这样采集的动物组织中RNA质量最好。
如条件不允许,还有生物公司出的RNA保存试剂,按照试剂的说明书操作即可操作。具体的您可以去网上搜索RNA 保存 试剂 即可。
长时间保存,且对RNA完整性无要求的,可以用石蜡包埋法长期保存,但对RNA质量有较大影响。

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看相关的试剂盒使用说明吧,每个试剂盒使用的要求不是很一样。我认为新鲜是主要的,其次,看什么组织啊,最后一般保存i在液氮罐中或者用特殊保护液保护起来