用EcorI和SalI酶切目的基因和载体后酶连,然后转化DH5a,涂板后却不长菌,是为什么呢?

用EcorI和SalI酶切目的基因和载体后酶连,然后转化DH5a,涂板后却不长菌,是为什么呢? 生物基因工程中用限制酶切割目的基因和运载体如果用同一种限制酶切割目的基因和运载体,再用DNA连接酶连接目的基因和载体,显而易见,可能会出现载体和载体连接,目的基因和目的基因连接 我要做基因的真核表达,用的酶是将XhoI 和EcoRI联用,怎么看酶切之后会不会发生移码问题呢?请多多指教!这是我用的真核表达质粒载体还有就是，我的那个目的基因有自己的启动密码子和终止 目的基因和载体构成目的基因的表达载体一般除了目的基因外还要包括----------等结构. 用同种限制酶切质粒和目的基因DNA,连接后,产生的载体-载体连接物不是也有标记基因而且在培养基上生长吗怎么筛选这种呢? 怎样防止目的基因和载体的自连 为何基因工程中,载体和目的基因要用同一种限制酶切割.既然这样,那为什么为了防止粘性末端乱连接,要用两种限制酶切割载体和目的基因. 目的基因和载体必须用同种限制酶还是只需要产生同种黏性末端即可? 用同种限制酶切质粒和含有目的基因的DNA,用DNA连接酶连接后为什么不会出现载体-目的基因连接物这种产物?额。。问错了。。再问一遍，就是他会产生三种连接产物，那其中的那种载体-载体 .下图是含某目的基因的DNA片段,据图回答下列问题.(1)根据图示可知,若用 EcoRI和SmaI 限制酶切割,则此DNA.下图是含某目的基因的DNA片段,据图回答下列问题.(1)根据图示可知,若用 EcoRI和SmaI 限制酶 49．右图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点,ampR为青霉素抗（3）在上述实验中,为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连 标记基因和目的基因是连在一起的吗?如何用标记基因筛选目的基因载体? pUC克隆载体相邻酶切位点PstI,SalI,XbaI酶切效率如何? 基因工程将目的基因拼接到载体上的一个问题~既然剪切目的基因和载体上限制酶切点的是同一种限制酶,那么从载体上剪下的片断应该与目的基因一样啊~那这样将目的基因再拼接到载体上又 双酶切老是切不完全我PCR克隆了一段200bp的基因片段,然后连接到了T载体,引物2端各有EcoRI和HindIII的酶切位点,但现在将T载体进行双酶切,缺总是切不完全,只有大约1/3的载体被切开,所以200bp的条 构建载体的时候,先用设计好的引物PCR所要的目的基因,再和T载体连接,再转化,再小抽,再双酶切,再和已经预先双酶切的目的载体连接,那么?先前的目的基因为什么不直接和目的载体相连呢?为什 我不理解为什么用同一种限制酶切割目的基因于载体?限制酶不是有专一性吗?用同一种不是说明载体上也有想要的基因?（那把载体直接导入不就行l )还有,限制酶把DNA切下两段.那怎么和载体 目的基因和载体的结合二者需用限制酶切割后变为重组载体,该过程与质粒上含有（） 有关